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为大家介绍一下:使用牛奶分析仪分析牛奶体细胞的来源和正常指标检测!当母牛的乳腺正常时,新鲜牛奶中分泌的体细胞主要是巨噬细胞,但是当乳腺发炎时,新鲜牛奶中分泌的体细胞主要是白细胞,这是一种免疫细胞,由身体和病原体引起物质。当母牛的乳腺组织被感染时,其中超过90%是嗜中性粒细胞。
当细菌侵入乳腺组织并开始繁殖时,它将导致免疫细胞(如多核白细胞)逐渐接近感染部位,并侵入乳腺吞噬病原微生物。另外,当发生炎症反应时,巨噬细胞大量增殖,并且产生一些化学介质,这进一步促进了炎症反应,导致组织毛细血管的通透性显着增加,促进了血浆白蛋白,免疫球蛋白和各种其他白细胞。侵入乳腺腔并形成白细胞进行吞噬作用。
常用检测牛奶体细胞的方法:
1,微观细胞计数方法。人工显微镜计数方法是一种直接检测方法,这意味着将鲜牛奶样品直接滴在载玻片上并用显微镜观察,然后手动计算其中包含的体细胞。用这种方法取鲜奶来检测体细胞:首先准备染色液,即取40 mL四氯乙烷和54 mL乙醇,充分摇匀,然后置于65°C的温热水溶液中。 3分钟,然后添加。将0.6 g的甲基蓝均匀混合,并置于4°C的冰箱中。当温度达到4°C时,添加6 mL的冰醋酸并在室温下保存。拿一个干净的载玻片并将其分成4个小方块。每个面积为1 cm2,然后将10μL新鲜牛奶样品放入带有微型注射器的1 cm2玻璃载玻片中,置于培养箱中,干燥并浸入染色溶液中以形成均匀的载玻片;在显微镜下观察载玻片上的染色细胞300至500次,并根据某些标准计数体细胞的数量。通常,根据“无编号,无编号,无权利”的计数规则进行计数,以防止遗漏和重复。尽管该方法易于使用且易于在实验室外操作,但整个操作过于繁琐且工作量很大,尤其是在计数时。
在人工显微镜计数方法的基础上,通过改进荧光显微镜计数方法,即使用特殊的缓冲液或染料溶液,然后使用配备有相应滤色镜的荧光显微镜进行计数,来处理鲜奶样品。通常,鲜牛奶中的蛋白质不会形成荧光,也不会影响测量。脂肪小球形成黄绿色荧光,可被相应的彩色滤光片阻挡。只能看到由体细胞形成的红色荧光,因此可以更好。通过将荧光细胞与周围的背景区分开,可以有效地提高计数的准确性。
2,加利福尼亚细胞数测定法(CMT法)是间接检测法。原理是将新鲜牛奶中的体细胞暴露于表面活性剂,如溴甲酚红紫色,烷基硫酸盐,烷基芳基。磺酸或氢氧化钠可引起细胞收缩和凝结,同时释放DNA并聚集。包含的体细胞越多,聚集状态越强,并且形成的团聚体越多。
这些聚集体的统计数据可以估计体细胞的数量。该方法所需设备少,操作简单,检测速度快,灵敏度高,价格低,结果相对准确,并且与直接显微细胞计数法和过氧化氢酶活性具有良好的相关性,并且受环境的影响。温度的影响很小,即使样品中混入了头发等异物,也不会影响结果。它适用于测试单个母牛或全部牛奶样品。